Diferența dintre polimerază Taq și polimerază ADN | Taq polimerază vs polimerază ADN

Anonim

Diferenta cheie - polimeraza Taq vs polimeraza ADN

ADN polimeraza este o enzima care creeaza ADN nou din blocurile sale de constructii (nucleotide). În procariote și eucariote, se găsesc diferite tipuri de ADN polimeraze. Dublarea ADN este posibilă datorită prezenței acestor enzime speciale, iar informația genetică este transmisă puilor prin acțiunea ADN polimerazelor. Taq polimeraza este un tip special de polimerază ADN care este termostabil și este utilizat pe scară largă în PCR. Taq polimeraza se găsește în bacterii termofile și se purifică în replicarea ADN in vitro. Diferența cheie între polimeraza Taq și ADN polimeraza este că Taq polimeraza poate rezista la temperaturi ridicate fără denaturare în timp ce alte ADN polimeraze denaturează la temperaturi ridicate (la temperaturi de degradare a proteinei).

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este polimeraza Taq

3. Ce este polimeraza ADN

4. Comparație comparație comparativă - polimerază Taq vs. polimerază ADN

5. Rezumat

Ce este polimeraza Taq?

Taq polimeraza (

Taq ADN polimeraza ) este o enzimă folosită pentru sinteza ADN in vitro prin tehnica PCR. Este produsă de bacteria termofilă numită Thermus aquaticus, care trăiește în izvoare termale și ventile termice. Taq polimeraza este o enzimă termostabilă care nu se degradează la temperaturi ridicate. Taq polimeraza a fost purificată pentru prima dată și publicată în Chien și colab. în 1976. Tehnica PCR se efectuează cu ajutorul polimerazei Taq datorită capacității sale de a tolera fluctuațiile de temperatură ridicată și de temperatură în timpul PCR. Taq polimeraza catalizează sinteza ADN atunci când există primeri, nucleotide și ADN-ul șablon monocatenar. Enzima constă dintr-o singură polipeptidă cu o greutate moleculară de aproximativ 94 kDa. Taq polimeraza prezintă activitatea optimă la 80 ° C și la pH 7-8 cu prezența ionilor de magneziu. Ea are activitate de polimerază și exonuclează. Enzima este compusă dintr-un lanț polipeptidic unic și gena pentru polimeraza Taq conține un conținut ridicat de G și C (67,9%). Polimeraza termostabilă Taq permite realizarea PCR la temperaturi ridicate care măresc specificitatea primerilor și reducerea producției de produse PCR nedorite (dimeri de primer). Taq polimeraza elimină, de asemenea, necesitatea de a adăuga noi enzime la reacția PCR după fiecare ciclu de reacție PCR datorită capacității sale de a rezista temperaturilor ridicate.Descoperirea polimerazei Taq a permis PCR să efectueze într-un singur tub închis într-o mașină relativ simplă. Datorită acestor proprietăți ale polimerazei Taq, PCR devine o tehnică populară de laborator obișnuită în multe analize de biologie moleculară privind analiza ADN.

Taq polimeraza este utilizată pe scară largă în tehnicile biologice moleculare și există o nevoie de producție de Taq polimerază pe scară largă. Prin urmare, folosind tehnologia ADN-ului recombinant și clonarea genelor, gena care a codificat DNA polimeraza Taq a fost clonată și exprimată în

Escherichia coli

. Acest lucru a facilitat în mare măsură producția de polimerază Taq recombinantă și a redus prețul acestei enzime pentru o utilizare adecvată. Figura 1: Polimeraza Taq Ce este polimeraza ADN?

ADN polimeraza este o enzimă care catalizează sinteza ADN-ului din nucleotide. Este cea mai precisă enzimă responsabilă pentru duplicarea genomului și transmiterea informațiilor genetice către descendenți. În timpul diviziunii celulare, ADN polimeraza duplică întreg ADN-ul său și transmite o copie fiecărei celule fiice. În 1955, Arthur Kornberg a fost descoperit ADN polimeraza în

E Coli

. Funcția ADN polimerazei depinde de mai multe cerințe; (dATP, dTTP, dCTP și d GTP), și o secvență scurtă de ARN (primer). Sinteza ADN-ului se face în direcția 5'to 3 'prin ADN polimerază. ADN-polimerazele pot fi grupate în șapte familii diferite: A, B, C, D, X, Y și RT (transcriptază inversă). Retrovirusurile codifică pentru RT; o ADN polimerază neobișnuită care are nevoie de un șablon de ARN pentru sinteza ADN. Există cinci tipuri diferite de ADN polimeraze găsite în procariote pentru roluri diferite în replicarea ADN. ADN polimeraza 3 este responsabilă pentru polimerizarea noii fire de ADN. ADN-polimeraza 1 este responsabilă pentru repararea și patching-ul ADN-ului. ADN-polimerazele 2, 4 și 5 sunt responsabile pentru repararea și corectarea ADN-ului. În eucariote, există 15 tipuri distincte de ADN polimeraze. Acestea includ cinci familii majore. Figura 2: DNA Polymerase ADN polimeraze sunt folosite in clonarea genei, PCR, secventiere ADN-ului, de detectare a SNP, diagnostic molecular, etc. Taq polimerază este un fel de ADN polimerază, care pot tolera temperaturi ridicate și să fie disponibile pentru Sinteza ADN-ului fără degradare. Care este diferența dintre polimeraza Taq și polimeraza ADN?

- diff Articol Mijloc înainte de masă ->

Taq polimerază vs polimerază ADN

Taq AD polimerază este o enzimă care creează ADN. Este o enzimă termostabilă găsită în termofile

ADN polimeraza este o enzimă care facilitează replicarea ADN și este găsită atât în ​​organismele procariote cât și în cele eucariote.

Degradarea la temperaturi ridicate

Taq polimeraza este activă la temperaturi ridicate.

ADN polimerazele se degradează la temperaturi ridicate de denaturare a proteinelor. Utilizați
Acest lucru este folosit pe scară largă în PCR
Taq polimeraza a înlocuit ADN polimeraza din coli
inițial utilizat în PCR.
Rezumat - polimerază Taq vs. ADN polimerază ADN polimerazele sunt enzimele care sintetizează ADN-ul de la deoxinucleotide (blocuri de construcție ale ADN-ului) atunci când șablonul și primerii sunt disponibili. ADN-polimerazele sunt necesare pentru a duplica ADN-ul celulelor și pentru a trece în celule fiice identice în timpul diviziunii celulare. ADN-polimerazele adaugă noi nucleotide la capătul 3 'al primerului și alungă noua sinteză a catenei ADN în direcția 5' la 3 '. ADN-polimeraza Taq este una dintre enzimele ADN polimerazice care este foarte utilă în metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR) de amplificare a ADN-ului. E. coli ADN polimeraza 1 a fost utilizată mai devreme pentru PCR, dar polimeraza comercială Taq a suplinit-o datorită specificității ridicate a legării primerului la temperaturi ridicate și producției unui randament mai mare al produsului dorit cu un produs de amplificare nespecific. Aceasta este diferența dintre polimeraza Taq și polimeraza ADN.

Referință:

1. Ishino, Sonoko și Yoshizumi Ishino. "ADN polimeraze ca reactivi utile pentru biotehnologie - istoria cercetării în domeniul dezvoltării în domeniu. "Frontiere în microbiologie. Frontiers Media S. A., 2014. Web. 28 februarie 2017 2 "Taq și alte polimeraze ADN termostabile" Springer Springer Olanda, 01 ianuarie 1970. Web 28 februarie 2017 3. Stillman, Bruce. "ADN polimeraze la furculița de replicare eucariote. "Celula moleculară, US National Library of Medicine, 09 mai 2008. Web 28 februarie 2017

4. EukaryoticDNAPolymerases - Universitatea din Oxford. (CC BY-SA 3. 0) prin Wikimedia Commons

2. "ADN polimeraza" de Yikrazuul - munca proprie (CC BY-SA 3. 0) prin Wikimedia Commons