Diferența dintre nitroceluloză și PVDF | Nitroceluloza vs. PVDF

Diferența cheie - nitroceluloză vs. PVDF

Western blotting este o metodă care permite detectarea și cuantificarea proteinelor specifice dintr-o probă de proteine. Fiabilitatea tehnicii depinde de alegerea unei membrane corecte pentru absorbția proteinelor din gel. Există diferite tipuri de membrane microporoase. Membranele de nitroceluloză și PVDF sunt două astfel de membrane preferate de cercetători datorită atributelor lor speciale față de celelalte tipuri de membrane. Selecția între nitroceluloză sau PVDF este, de asemenea, o altă provocare în Western blotting. Atât nitroceluloza cât și PVDF au o capacitate mare de absorbție a proteinei. Diferența cheie între membrana nitrocelulozei și membrana PVDF este că membranele de nitroceluloză nu au capacitatea de stripare a anticorpilor și reutilizarea membranei pentru reprobarea anticorpilor, în timp ce membranele PVDF au capacitatea de stripare și reutilizare .

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este Nitroceluloza

3. Ce este PVDF

4. Comparație între ele - nitroceluloză vs. PVDF

5. Rezumat

Ce este Nitroceluloza?

Nitroceluloza este un polimer fabricat prin tratarea celulozei cu acid azotic și este utilizat pentru a produce membrane microporoase în biologia moleculară, în special pentru tehnicile de blotare cum ar fi blotting-ul de la sud, nord și vest. Dimensiunile porilor membranelor de nitroceluloză variază de la 3 la 20 pm. Membranele microporoase de nitroceluloză facilitează detectarea reacției imunochemice care se produce pe suprafața membranei. Prin urmare, membranele de nitroceluloză sunt frecvent utilizate pentru imobilizarea proteinelor și detectarea proteinelor specifice în western blotting. Membranele de nitroceluloză pot, de asemenea, imobiliza glicoproteinele și acizii nucleici.

Membranele de nitroceluloză sunt preferate în analizele de flux lateral datorită mai multor caracteristici. Membranele de nitroceluloză absorb proteinele la o concentrație ridicată. Solventul utilizat pentru a umezi membrana nu diminuează absorbția membranei de nitroceluloză. Membranele de nitroceluloză pot fi ușor tăiate la dimensiunea dorită a gelului și transferă proteine ​​din gel în membrană prin transfer electric sau capilar. Nitroceluloza permite fluxul mai rapid de proteine ​​prin membrana cu potențial ridicat de legare. Nitroceluloza prezintă o rezistență îmbunătățită la manipulare. Un alt atribut special al membranei nitrocelulozice este faptul că poate fi ușor lipit cu adezivi rezistenți la apă non-solvenți pe diverse suporturi din material plastic.

Figura 01: Membrană nitrocelulozică pentru blot cu Western

Ce este PVDF?

Difluorura de poliviniliden (PVDF) este fluoropolimer produs prin polimerizarea difluorurii de viniliden și are o capacitate ridicată de imobilizare a proteinelor. Prin urmare, membranele microporoase obținute din PVDF sunt utilizate în tehnicile Western blotting pentru a analiza proteinele specifice din amestecurile de proteine. De asemenea, membranele PVDF pot fi utilizate pentru analiza aminoacizilor și pentru secvențierea proteinelor. Cea mai importantă caracteristică a membranei PVDF față de membrana nitrocelulozei este aceea că poate fi desprinsă cu ușurință de anticorpi și reutilizată pentru sondele ulterioare de anticorpi.

Membranele PVDF sunt mai groase decât membranele de nitroceluloză; prin urmare, mai rezistente la daune în timpul reutilizării. Membranele PVDF sunt foarte hidrofobe. De aceea, acestea trebuie să fie înmuiate în metanol sau izopropanol înainte de utilizare.

Care este diferența dintre nitroceluloză și PVDF?

- diff Articol Mijloc înainte de masă ->

Nitroceluloză vs PVDF

Nitroceluloza este un polimer compus din celuloză.

PVDF este un fluoropolimer produs prin polimerizarea difluorurii de viniliden.
Dimensiunea porilor membranei	Dimensiunile tipice ale porilor sunt 0. 1, 0. 2 sau 0. 45μ
Dimensiunile tipice ale porilor sunt 0. 1, 0. 2 sau 0. 45μm
Capacitate de legare a proteinei Nitroceluloza are o capacitate de legare a proteinelor de 80 până la 100 μg / cm	2
.
PVDF are o capacitate de legare a proteinei de 170 până la 200 μg / cm 2 .	Sensibilitate Aceasta are o sensibilitate scăzută în comparație cu PVDF. Aceasta are o sensibilitate ridicată.
Detectarea proteinelor slab exprimate
Deoarece sensibilitatea este scăzută în membranele de nitroceluloză, aceasta nu este adecvată pentru detectarea proteinelor slab exprimate.	Aceasta este mai potrivită pentru detectarea proteinelor exprimate slab datorită sensibilității sale ridicate.
Zgomot de fond
Acest zgomot de fundal este mai mic	Acest lucru are un zgomot de fundal mai mare.
Interacțiuni cu proteine ​​
Moleculele de proteine ​​se leagă de membranele de nitroceluloză prin interacțiuni hidrofobe.	Proteinele se leagă de membranele PVDF prin interacțiuni hidrofobe și dipolice.
Natura membranei
Nitroceluloza este fragilă și fragilă. Cu toate acestea, sunt disponibile versiuni de nitroceluloză și sunt rezistente.	PVDF este mai durabil și are o rezistență chimică mai mare.
Abilitatea de stripare și reutilizare
Nitroceluloza poate avea dificultăți în îndepărtarea și reprobarea fără a pierde semnalul.	PVDF este ideal pentru reprobarea și secvențierea aplicațiilor.
Suficiența
Nitroceluloza este ideală pentru detectarea proteinelor cu greutate moleculară scăzută.	PVDF este mai potrivit pentru detectarea proteinelor cu greutate moleculară mai mare.
Alte utilizări
Nitroceluloza poate fi utilizată pentru analiza acidului nucleic și blotting-ul punct / slot.	PVDF poate fi utilizat pentru sisteme de secvențiere a proteinelor și sisteme de testare în fază solidă.
Cost
Acest lucru este mai ieftin decât membranele PVDF.	Acest lucru este mai scump decât membranele de nitroceluloză.
Necesitatea de umezire
Membranele de nitroceluloză nu necesită presare cu metanol	Membranele PVDF necesită presare cu metanol.
Rezumat - nitroceluloză vs PVDF
Membranele de nitroceluloză au fost primele membrane utilizate comercial pentru analiza debitului lateral. Ei au o capacitate mare de absorbție a proteinelor. Prin urmare, membranele de nitroceluloză sunt utilizate în western blotting. PVDF este un alt tip de membrană utilizat în western blotting și are, de asemenea, o capacitate mare de absorbție a proteinei. Ambele tipuri sunt utilizate în Western blot pentru analiza proteinelor. Cu toate acestea, membranele PVDF au mai multe atribute speciale, făcându-le mai potrivite decât membranele de nitroceluloză pentru western blotting. Dar, membranele de nitroceluloză sunt mai potrivite pentru detectarea proteinelor cu greutate moleculară scăzută, membranele PVDF sunt mai potrivite pentru detectarea proteinelor cu greutate moleculară ridicată. Aceasta este diferența dintre membranele de nitroceluloză și PVDF.	Amabilitatea imaginii:

1. "Western blot transfer" de Bensaccount la Wikipedia în engleză (CC BY 3. 0) prin Wikimedia Wikimedia

Referință:

1. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun și Thomas A. Neubert. "Utilizarea membranelor de nitroceluloză pentru caracterizarea proteinei prin spectroscopie de masă cu laser de desorbție / ionizare cu ajutorul matricei. " Chimie analitică. Biblioteca Națională de Medicină din S.U.A., 15 iulie 2006. Web. 28 martie 2017

2. "Markeri moleculari și biotehnologie a plantelor. "Google Cărți. N. p., n. d. Web. 28 martie 2017

3. Luni, 8 aprilie 2013 Tweet. "Magicul este în membrană: alegeți cu înțelepciune pentru rezultate Best Western Blot. "Biocompare. N. p., 08 aprilie 2013. Web. 28 martie 2017