Diferența dintre imunofluorescență și imunohistochimie | Imunofluorescență vs. imunohistochimie

împotriva imunohistochimiei

Diagnosticarea bolilor, care utilizează metode biologice moleculare, a devenit o zonă în curs de dezvoltare a tehnologiei clinice de laborator. Acesta include toate testele și metodele de identificare a unei boli și de a înțelege cauza unei boli prin analizarea ADN-ului, a ARN-ului sau a proteinelor exprimate într-un organism. Progresele rapide ale diagnosticului molecular au permis cercetarea fundamentală asupra bolilor transmisibile și non-transmisibile. Acestea sunt folosite pentru a determina modificările în secvența sau nivelurile de exprimare în genele sau proteinele importante implicate în boală. Imunofluorescența (IF) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului. IF este un tip de IHC unde se folosește o metodă de detectare a fluorescenței pentru analiza anticorpilor monoclonali și policlonali, în timp ce IHC folosește metode chimice pentru a detecta anticorpii monoclonali și policlonali. Aceasta este diferența cheie dintre IF și IHC.

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este imunofluorescența

3. Ce este imunohistochimia

4. Asemănări între imunofluorescență și imunohistochimie

5. Comparație comparativă - imunofluorescență vs. imunohistochimie sub formă de tabel

6. Rezumat

Ce este imunofluorescența (IF)?

Imunofluorescența este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în analiză sunt marcați utilizând coloranți fluorescenți sau proteine fluorescente pentru scopul de detectare. Etichetele anticorpilor secundari pot duce la semnale de fundal nedorite; prin urmare, tehnica IF se bazează pe etichetarea anticorpului primar în sine în prezent pentru a evita semnalele nedorite în timpul detectării. Prin această tehnică, se împiedică legarea nespecifică între anticorpul primar și secundar și este mai rapidă, deoarece nu este implicată nici o etapă de incubare secundară. De asemenea, calitatea datelor este îmbunătățită.

Figura 01: Dubla imunofluorescență dublă pentru BrdU, NeuN și GFAP

Fluorocromii sau coloranții fluorescenți sunt compuși care pot absorbi radiațiile, de preferință radiațiile ultraviolete care sunt excitate. Atunci când particulele ajung la starea de bază din starea excitat, ele emit radiații care sunt captate și detectate de un detector pentru a forma un spectru.Este foarte important ca eticheta fluorescentă să fie compatibilă și stabilă pentru reacția particulară și trebuie să fie conjugată corespunzător cu anticorpul pentru a obține rezultate precise. Unul dintre cele mai utilizate fluorochromi este izotiocianatul de fluoresceină (FITC), care are culoarea verde, cu lungimi de undă de absorbție și emisie de vârf de 490 nm și respectiv 520 nm. Rhodamina, un alt agent utilizat în IF, are culoare roșie și are lungimi de undă distincte de absorbție și de emisie de 553 nm și 627 nm.

Ce este imunohistochimia (IHC)?

IHC este o metodă de testare moleculară practicată pentru a identifica și a confirma prezența antigenului în celula țintă. Celula țintă ar putea fi o particulă infecțioasă, un patogen microbian sau o celulă tumorală malignă. IHC utilizează anticorpi monoclonali și policlonali pentru a determina prezența antigenelor prezente pe suprafața celulară a celulelor țintă. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp. Un marker de detectare este conjugat cu acești anticorpi pentru a detecta prezența sau absența antigenului particular. Acești markeri pot fi markeri chimici, cum ar fi enzime, anticorpi marcați fluorescent sau anticorpi marcați radio.

Cea mai populară aplicație a IHC este în biologia celulelor canceroase pentru a identifica prezența tumorilor maligne, dar este de asemenea folosită pentru detectarea bolilor infecțioase.

Care sunt asemănările dintre imunofluorescență și imunohistochimie?

Imunofluorescența și imunohistochimia au loc în condiții in vitro.

Ambele tehnici se bazează pe antigen-anticorp

Ambele sunt tehnici foarte rapide.

Rezultatele tehnicilor sunt reproductibile.
Ambele au îmbunătățit calitatea datelor.
Aceste tehnici utilizate în diagnosticarea cancerului și bolilor infecțioase.
Care este diferența dintre imunofluorescență și imunohistochimie?
- diff Articol Mijloc înainte de masă ->
Imunofluorescență vs. imunohistochimie

IF este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în analiză sunt marcați utilizând coloranți fluorescenți sau proteine fluorescente pentru detectare.

IHC este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în analiză sunt etichetați folosind chimicale sau elemente radioactive pentru detectare.

Precizie
Precizia este mai mare în cazul tehnicii IF comparativ cu IHC.	Precizia este mai mică în IHC.
Specificitatea
IF este mai specific.	IHC este mai puțin specifică.
Rezumat - Imunofluorescență vs. imunohistochimie
Mecanismele moleculare au adus multe modificări în domeniul medicinei, dând naștere unor metode avansate de testare moleculară care au dus la revoluții în domeniul diagnosticării. Aceste invenții au condus la o identificare rapidă și exactă a bolii, permițând astfel administrarea și producerea cu succes a medicamentelor. Aceste tehnici sunt de asemenea utilizate în farmacologie pentru a găsi țintele medicamentelor și pentru a confirma proprietățile farmacocinetice ale medicamentului în timpul metabolizării medicamentului.IF și IHC sunt două metode de diagnostic care se bazează pe conceptul de legare a antigenului și a anticorpului, deși modul de detectare în ambele tehnici diferă. IF utilizează principiul fluorescenței pentru a detecta antigenul și IHC folosește conceptul de conjugare chimică pentru a detecta antigenul. Aceasta este diferența dintre IF și IHC.	Descărcați versiunea PDF a imunofluorescenței în funcție de imunohistochimie

Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei citate. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre imunofluorescență și imunohistochimie.

Referințe:

1. Aoki, Valéria și colab. "Imunofluorescența directă și indirectă. "Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, disponibil aici. Accesat 25 august 2017.

2. Duraiyan, Jeyapradha și colab. Aplicații ale imunohistochimiei. "Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, publicații Medknow & Media Pvt Ltd, august 2012, disponibil aici. Accesat la data de 25 august 2017.

Amabilitatea imaginii:

1. "Dubla imunofluorescență colorată pentru BrdU, NeuN și GFAP" Prin Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2, Liu X. șoarecii după accident vascular cerebral reduc volumul infarctului și cresc neurogenesis în zona subventriculară; PMID 19077183 (CC BY 2. 0) prin intermediul Wikimedia Commons

2. "Hipotalamus al unui țesut de șoarece murdar de ABC-Imunohistochimie" Prin zabbn - Muncă proprie (CC BY-SA 3. 0) prin Wikimedia