Diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului | Electroforeza capilară vs electroforeza gelului
Diferența cheie - Electroforeza capilară vs. Electroforeza gelului
Electroforeza este o tehnică care se utilizează pentru a separa biomolecule pe baza particulelor, și forma particulei. Migrarea moleculei, cunoscută sub numele de mobilitate electroforetică , depinde de tipul de polimer / gel utilizat, dimensiunea porilor, tensiunea furnizată, timpul de funcționare și raportul suprafață / volum. Există diferite tipuri de tehnici de electroforeză bazate pe tipul de biomolecule utilizate. Primul tip de electroforeză inventat a fost electroforeza pe hârtie în care a fost utilizată o hârtie de nitroceluloză ca mediu pentru separarea biomoleculelor. Principiul electroforezei în gel, în care diferite geluri cu dimensiuni de pori au fost utilizate pentru separarea biomoleculelor, a fost inventat mai târziu. Tehnica de electroforeză a gelului a fost modificată în continuare pentru a îmbunătăți acuratețea tehnicii, și o astfel de modificare este electroforeza capilară. Diferența esențială dintre electroforeza capilară și electroforeza în gel este aceea că se efectuează pe un plan vertical sau orizontal cu ajutorul unui gel polimeric cu dimensiunea standard a porilor, în timp ce electrophoresa capilară este efectuată într-un tub capilar cu un lichid polimeric sau gel.
CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie
2. Ce este electroforeza gelului
3. Ce este electroforeza capilară
4. Asemănări între electroforeza capilară și electroforeza gelului
5. Comparație comparație comparativă - Electroforeză capilară vs electroforeză în gel în formă tamponată
6. Rezumat
Ce este electroforeza gelului?
Electroforeza gelului este o tehnică utilizată pentru a separa în principal acizii nucleici, proteinele sau aminoacizii în funcție de încărcătura, dimensiunea și forma lor. Această tehnică folosește un gel fizic, care este o substanță polimerică, ca mediu de separare. Cele mai frecvent utilizate geluri sunt Agaroza (pentru separarea acidului nucleic) și Poliacrilamida (pentru separarea proteinelor). Aparatul pentru electroforeză pe gel conține tava de turnare cu gel pentru prepararea gelului, piepteni pentru turnarea fântânilor, rezervor tampon, electrozi pozitivi (anodici) și negativi (catozi) și unitatea de alimentare cu tensiune.Molecule precum ADN sau ARN, care sunt încărcate negativ, se deplasează de la catod la anod și moleculele care sunt încărcate pozitiv se deplasează invers. Prepararea gelului se face în conformitate cu cerința. Dacă este necesară o rezoluție înaltă sau o separare a moleculelor, trebuie pregătit un gel cu concentrație ridicată, cu o dimensiune a porilor mai mici. Moleculele separate pe matricea de gel sunt observate după o tehnică de colorare. Moleculele separate apar ca benzi pe matricea de gel.
Figura 01: Electroforeza gelului
Electroforeza gelului este utilizată în diagnosticarea moleculară, cum ar fi amprentarea ADN-ului pentru a determina prezența unui fragment specific de ADN / ARN sau a unei proteine. Gelul determină, de asemenea, puritatea probei biomolecule extrase. Gelul electrophoresis este efectuat ca o etapă preliminară pentru in și hibridizare și ca o analiză de confirmare după secvențiere.
Ce este electroforeza capilară?
Electroforeza capilară este o modificare a electroforezei pe gel, care folosește același principiu de separare pe baza încărcării, mărimea moleculei, dar se realizează într-un tub capilar cu substanță gel sau polimer lichid. Capilarele sunt preparate din silice topită și fiecare tub capilar are un diametru interior de 50-100 μm și are o lungime de 25-100 cm. Probele sunt injectate în tubul capilar care conține materialul polimeric și se separă mult mai rapid decât electroforeza convențională pe gel. Sistemul capilar este bine protejat în interiorul unei jachete izolatoare care protejează eșantionul de orice contaminare. Capilarele pot fi umplute cu polimeri lichizi cum ar fi hidroxietil celuloza sau geluri de înaltă rezoluție, cum ar fi poliacrilamida. Electroforeza capilară oferă o rezoluție mai mare; prin urmare, separarea este mai precisă. Electroforeza capilară utilizează un sistem automat de detecție prin analiză spectrofotometrică. Acest lucru se datorează raportului de suprafață mai mare la volum.Figura 02: Electroforeza capilară
Electroforeza capilară este utilizată în situații precum criminalistica unde este necesară o precizie mai mare și nu este frecvent utilizată, deoarece este o tehnică costisitoare.
Care sunt asemănările dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului?
Separarea moleculelor în ambele tehnici se bazează pe sarcina și mărimea moleculei.
Ambele tehnici pot fi utilizate pentru a separa atât acizii nucleici cât și proteinele.
- Volumul eșantionului celor două tehnici este același.
- Ambele tehnici utilizează un tampon pentru a facilita separarea.
- Care este diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza gelului?
- - diff Articolul Mijloc înainte de masă ->
Electroforeză capilară vs electroforeză pe gel
Electroforeza capilară este o tehnică care separă biomoleculele de un tub capilar utilizând un mediu polimer lichid sau gel.
Electroforeza gelului este o tehnică care separă biomoleculele pe un plan vertical sau orizontal folosind un mediu de polimer. |
|
| Separare | În electroforeza capilară, separarea se face în interiorul unui tub capilar. |
| În electroforeza pe gel, separarea se face pe un plan vertical sau orizontal. | |
| Mediu de separare | Polimerii lichizi precum hidroxietilceluloza sunt utilizați în electroforeza capilară. |
| Gelurile, fie agaroză sau poliacrilamidă, sunt utilizate ca mediu în electroforeză în gel. | |
| Legătură transversală | Rezoluția înaltă poate fi obținută prin electroforeză capilară. |
| Rezoluția este redusă în electroforeza pe gel. | |
| Raportul volum al suprafeței față de volum | Raportul dintre suprafață și volum este ridicat în electroforeza capilară. |
| Raportul dintre suprafață și volum este scăzut în electroforeza pe gel. | |
| Tehnica de detectare | Detectarea se face prin detectori spectrofotometrici automatizați în electroforeză capilară. |
| Colorarea și observarea prin transiluminator UV se fac ca tehnici de detectare în electroforeza pe gel. | |
| Rezumat - Electroforeza capilară vs electroforeza gelului | Diagnosticarea moleculară joacă un rol major în lumea științifică. Identificarea și purificarea ADN-ului, ARN-ului și a proteinelor reprezintă etape critice în procedurile de diagnosticare. Electroforeza este o tehnică care separă și identifică biomolecule atât în electroforeza pe gel, cât și în electroforeza gelului capilar avansat. Electroforeza gelului se efectuează într-un plan vertical sau orizontal folosind un gel polimeric cu dimensiunea standard a porilor, în timp ce electroforeza capilară este efectuată într-un tub capilar cu un lichid polimeric sau un gel. Aceasta este diferența dintre electroforeza capilară și electroforeza pe gel. După terminarea tehnicii de electroforeză, biomoleculele sunt prelucrate în continuare pentru a obține informații de nivel superior prin hibridizare sau prin tehnici precum amprentarea. |
Descărcați versiunea PDF a electroforezei capilare și a electroforezei pe gel
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline conform notei citate. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre electroforeza gelului și electroforeza capilară.
Referințe:
1. Durney, Brandon C. și colab. "Electroforeza capilară aplicată ADN-ului: determinarea și valorificarea secvenței și structurii pentru a avansa bioanalizele (2009-2014). "Chimia analitică și bioanalitică, Springer Berlin Heidelberg, 2015, disponibil aici. Accesat la 28 august 2017.
2. "Electroforeză. "Universitatea din Leicester, 8 ianuarie 2009, disponibil aici. Accesat 28 august 2017.
3. "Electroforeză cu gel. "Academia Khan, disponibilă aici. Accesat la 28 august 2017.
Amabilitatea imaginii:
1. "Electroforeza pe gel de agaroză a ADN" de către Scoala de Resurse Naturale din Ann Arbor - laborator de ADN (CC BY 2. 0) prin intermediul Wikimedia Commons
