Diferența dintre lipirea și lipirea finală a lipsei | Blunt vs Ligație finală lipicioasă

Diferența cheie - Ligație finală blastică vs. lipicios

Endonucleazele de restricție sunt enzime specifice care taie ADN dublu catenar (dsDNA). Ele sunt, de asemenea, cunoscute ca foarfece moleculare în biologie moleculară. Enzimele de restricție sunt capabile să recunoască secvențele scurte specifice ale dsDNA cunoscute ca situsuri de recunoaștere și să creeze legături de fosfodiester și hidrogen pentru a deschide dublu fire. Ca rezultat al scindării prin aceste enzime, fragmentele de ADN sunt produse cu diferite tipuri de capete, cum ar fi capetele lipicioase și capetele taiate. ADN ligaza este o enzimă folosită în biologia moleculară pentru a uni două catene adiacente de ADN prin formarea de legături noi. Etapa este cunoscută sub formă de ligare și în funcție de tipul de capăt al ADN-ului ligat, acestea pot fi denumite ligare de capăt și ligatura finală lipicios. Diferența majoră dintre ligatura finală lipită și lipicioasă este aceea că se face legătura între capătul blunt între fragmentele ADN care conțin două capete tangente în timp ce legătura lipiciosului dintre capătul are loc între consolele 5 'și 3'. În comparație cu ligatura finală, ligaturarea lipidică este mai eficientă și mai stabilă.

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este Blunt End Ligation

3. Ce este Ligația Sticky End

4. Comparație comparativă comparativă - Blunt vs. Ligație finală lipicioasă

5. Rezumat

Ce este o ligaturarea finală fără rost?

Unele endonucleaze de restricție pot să taie ADN-ul la bazele opuse și să producă fragmente de ADN cu capăt tangent. Aceste enzime sunt cunoscute sub denumirea de tăietori de capăt; ele se desprind direct în mijlocul locului de restricție, fără a lăsa bazele care depășesc o singură coloană. Capetele brute sunt, de asemenea, cunoscute sub denumirea de capete non-înclinate, deoarece nu au baze înclinate de 3 'și 5' la capete. Ambele fire se termină de la perechi de baze în capete ciupite. Enzimele de tăiere finale obișnuite sunt EcoRV HaeIII, AluI și Smal.

Ligarea de capături brute este implicată între două capete bont. Nu este o ligare a bazelor proeminente. Această ligare este mai puțin eficientă decât ligaturarea finală lipicioasă. Cu toate acestea, în anumite ocazii, legarea la capătul tampon devine mai avantajoasă decât ligaturarea finală lipicioasă, în special atunci când se leagă produsele PCR. Produsele PCR sunt întotdeauna produse cu capete bont. Bluntul de legare la capăt nu necesită capete complementare în ADN pentru ligare.

Figura 01: Producția finală tardivă de enzima EcoRV

Ce este o lipire finală lipicioasă?

Unele endonucleaze de restricție sunt capabile să taie dsDNA, lăsând o bucată de ADN monocatenar la capăt. Aceste capete sunt cunoscute sub denumirea de capete lipicioase sau înclinate. Lipirea lipidică finală are loc între două fragmente de ADN care conțin console asemănătoare deoarece capetele lipicioase sunt posedate cu baze nepereche și necesită baze complementare pentru a forma legături. Prin urmare, este necesar să se utilizeze aceeași enzimă de restricție pentru ambele surse de ADN pentru a produce fragmentele de ligare potrivite.

Legarea lipidelor finale este mai eficientă și este adesea foarte dorită în procesele de clonare. Există câteva enzime de restricție care produc capete lipicioase. Ei sunt EcoRI, BamHI, HindIII, etc.

Figura 02: Producția finală lipicioasă de către enzima Eco RI

Care este diferența dintre Ligația Blunt și Sticky End Ligation?

- diff Articol Mijloc înainte de masă ->

Blunt vs Ligație finală lipicioasă

Ligarea finală bluntă are loc între două fragmente ADN finale.

Legarea lipidică finală are loc între două fragmente de ADN care se potrivesc cu capete lipicioase.
Enzime	Cutter-urile finale cu tăietură fină produc capete ciupite.
Tăietoarele lipite adezive produc capete lipicioase sau coezive.
Cerința de potrivire se încheie	Nu necesită fragmente potrivite sau baze complementare.
Este nevoie de baze complementare la capete pentru a forma perechi de baze.
Eficiență	Este mai puțin eficientă decât ligaturarea finală lipicioasă
Este mai eficientă decât ligaturarea finală.
Rezumat - Ligație finală împrăștiată împotriva lipidelor	Endonucleazele de restricție sunt capabile să desprindă dsDNA și să producă fragmente de ADN cu capete diferite. Ei recunosc secvențe specifice și restricționează ADN-ul creând capete lipicioase și lipsite de sens. Capetele lipicioase au baze nepereche la sfârșitul fragmentelor. Capetele brute sunt create datorită unei clivajări drepte și au perechi de bază la capete. Lipirea lipidică finală necesită două bucăți complementare de ADN monocatenar. Blindurile de capăt îngust se întâlnesc între oricare două fragmente de capăt. Aceasta este diferența dintre ligaturarea lipicioasă și lipicioasă.

Referințe:

1. Roberts, Richard J. "Cum enzimele de restricție au devenit cai de lucru ai biologiei moleculare. "Procesele Academiei Naționale de Științe. National Acad Sciences, nr. d. Web. 12 aprilie 2017

2. Adnan, Amna. Utilizări ale enzimelor de restricție în biotehnologie. N. p., n. d. Web. 12 aprilie 2017

Amabilitatea imaginii:

1. "Site de restricționare EcoRV. rsh "De Ramin Herati - Creat cu Inkscape (Domeniul Public) prin Wikimedia Wikimedia

2. "Enzima de restricție Eco RI" De Tinastella - Activitate proprie (Domeniul Public) prin Wikimedia Wikimedia