Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia | In situ hibridizare vs. imunohistochimie

Anonim

Diferența cheie - in situ hibridizarea vs. imunohistochimie

Diagnosticarea bolilor infecțioase și a bolilor infecțioase este o tendință populară în care se folosesc noi tehnici de proteomică și genomică în scopul identificării tumorilor sau infecțioase celulele, proliferarea sa și site-urile de dezvoltare a celulelor și analiza bazei genetice a majorității bolilor transmisibile și netransmisibile. Acest lucru va duce la o prelucrare și proiectare precisă a medicamentelor și la dezvoltarea de terapii personalizate pentru boli. Hibridizarea in situ (ISH) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului, iar diferența esențială dintre hibridizarea in situ și imunochimia constă în moleculele utilizate în procedura de analiză. În ISH, probele de acid nucleic sunt utilizate în analiză, în timp ce în IHC se utilizează anticorpi monoclonali și policlonali pentru determinările de diagnosticare.

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este hibridizarea in situ

3. Ce este imunohistochimia

4. Asemănări între hibridizare in situ și imunohistochimie

5. Comparație comparativă comparativă - Hibridizare in situ vs. imunohistochimie sub formă de tabel

6. Rezumat

Ce este hibridizarea in situ (ISH)?

Hibridizarea in situ este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care este efectuată direct pe o porțiune sau pe o secțiune a țesutului, în întregul țesut sau în celule. Tehnica depinde de teoria combinării bazei complementare Watson Crick, rezultând fie hibrizi ADN-ADN sau hibrizi ADN-ARN care pot detecta gene mutate sau pot identifica gena necesară de interes. Secvențele de ADN cu catenă dublă, secvențe de ADN dublu catenar, secvențe de ARN monocatenare sau secvențe oligonucleotidice sintetice sunt utilizate ca probe în timpul tehnicii de hibridizare și aceste probe sunt marcate cu un fosfor radioactiv la capătul 5 'pentru proceduri de identificare după autoradiografie sau marcate folosind coloranți fluorescenți. Există diferite tipuri de tehnici ISH disponibile pe baza tipului de sondă utilizat și a tipului de tehnică de vizualizare urmată.

Figura 01: Hibridizarea fluorescentă în situ

Există multe aplicații ale ISH, în special în diagnosticarea moleculară a bolilor infecțioase, în scopul identificării prezenței agenților patogeni și confirmării patogenului prin diagnosticarea moleculară.Este de asemenea utilizat în domeniile biologiei dezvoltării, cariotipării și analizei filogenetice și al cartografierii fizice a cromozomilor.

Ce este imunohistochimia (IHC)?

În tehnica IHC, molecula principală analizată este antigenul. În timpul IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor la infecție sau la proliferarea celulelor maligne. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp, iar pentru această tehnică se utilizează etichete enzimatice; o astfel de aplicație este testul ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Markerii pot fi de asemenea anticorpi marcați fluorescenți sau anticorpi marcați radio.

Figura 02: Imunohistochimie

IHC este utilizat pe scară largă pentru detectarea celulelor canceroase. Procedurile de diagnostic vizează antigenele prezente pe celulele tumorale pentru identificarea și caracterizarea tumorii. Aceeași procedură este incorporată pentru diagnosticarea agenților infecțioși. Anticorpii monoclonali și policlonali sunt, de asemenea, utilizați pentru a analiza diferite produse genetice, permițând reacția de legare a anticorpului-antigen între proteina dorită și anticorpul sintetic administrat.

Care sunt asemănările dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?

ISH și IHC sunt reacții foarte specifice.

Ambele tehnici sunt foarte precise.

  • Ambele tehnici pot fi folosite în diagnosticarea cancerului și bolilor infecțioase.
  • Aceste tehnici sunt efectuate în medii sterile in vitro.
  • Ambele sunt tehnici rapide care oferă rezultate reproductibile.
  • ISH și IHC utilizează metode de detectare, cum ar fi etichetarea radio și tehnicile de fluorescență.
  • Care este diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?
  • - diff Articol Mijloc înainte de masă ->

In situ hibridizare vs. imunohistochimie

ISH este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care este efectuată direct pe o porțiune sau o secțiune a țesutului sau pe întregul țesut.

IHC este o tehnică în care anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor care sunt markeri specifici ai proteinei plasați pe suprafețele celulare.

Tipul de molecule bio analizate ISH analizează acizii nucleici.
IHC analizează proteinele-antigene.
Bazele reacției biochimice În această tehnică apare legătura complementară de bază între DNA-ADN sau ADN-ARN.
Interacțiunile antigen-anticorp sunt implicate în imunohistochimie.
Metode de detecție legate de enzime Metodele de detecție legate de enzimă nu pot fi utilizate în ISH.
Metodele de detecție legate de enzimă pot fi utilizate în IHC.
Rezumat - Hibridare in situ vs imunohistochimie Diagnosticarea moleculară este o metodă rapidă și de confirmare care poate fi utilizată pentru a identifica o boală ne-transmisibilă cum ar fi cancerul sau boala transmisibilă, cum ar fi HIV sau Tuberculoza, pe baza markerilor moleculari prezenți pe celule care duc la manifestarea bolii. Markerii moleculari pot fi prezenți sub formă de proteine ​​exprimate sau la nivel genetic, pe baza cărora sunt introduse diferite tehnici noi pentru a crește eficiența și sunt mai puțin laborioase, deși există un cost ridicat asociat acestor tehnici.Astfel, ISH depinde de formarea hibrid ADN-ADN sau ADN-ARN, iar IHC depinde de reacțiile specifice dintre anticorp și antigen. Aceasta este diferența dintre hibridizarea in situ.

Descărcați versiunea PDF a In Situ Hybridization vs. Immunohistochemistry

Aveți posibilitatea să descărcați versiunea PDF a acestui articol și să o utilizați în scopuri offline conform notei citate. Descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia.

Referințe:

1. Duraiyan, Jeyapradha și colab. Aplicații ale imunohistochimiei. "Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, publicații Medknow & Media Pvt Ltd, august 2012, disponibil aici. Accesat 24 august 2017.

2. "Hibridizarea în situ (ISH). Centrul National de Informatii Biotehnologie, Biblioteca Nationala de Medicina din S.U.A., disponibil aici. Accesat la 24 august 2017.

Amabilitatea imaginii:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" de MrMatze - Activitate proprie (CC BY-SA 3. 0) prin Wikimedia Commons

2. "Immunohistochemicalstaining2" De Imoen la limba engleza Wikipedia (CC BY-SA 3. 0) prin Commons Wikimedia