Diferența dintre ELISA direct și indirect | ELISA direct vs. indirect

Diferența cheie - ELISA directă vs. indirectă

Un test imunologic legat de enzime (ELISA), cunoscut și ca imunoteste enzimatic, este un test serologic care detectează anticorpi în sânge . Este folosit ca instrument de diagnosticare pentru a afla dacă pacientul a fost expus unui anumit tip de virus sau a altui agent infecțios (antigen) și dacă organismul a produs anticorpi împotriva infecției. De asemenea, ELISA poate identifica infecțiile din trecut și cele actuale. Prin urmare, ELISA este adesea folosit ca un test de prescreening de către medici înainte de analiza aprofundată a bolilor. Acest test poate fi efectuat în laborator prin luarea unei probe de sânge de la pacient. Există două tipuri de test ELISA: ELISA direct și ELISA indirectă. Diferența principală dintre ELISA directă și indirectă este că este mai sensibilă și necesită adăugarea unui anticorp secundar în timp ce ELISA direct este mai puțin sensibilă și utilizează numai un anticorp primar .

CUPRINS> 1. Prezentare generală și diferență cheie

2. Ce este ELISA direct

3. Ce este ELISA indirect

4. Comparație comparativă comparativă - ELISA direct vs. indirect

5. Rezumat

Ce este ELISA direct?

ELISA este un test de diagnostic al bolii efectuat pentru a identifica prezența anumitor antigene sau anticorpi în sânge. Se face ca un test de placă. Foloseste anticorpi legati de enzime usor analizate. Prezența antigenelor în proba de ser se leagă cu anticorpi specifici legați de enzime. În etapa finală, se adaugă un substrat specific pentru a reacționa cu enzima. Enzima transformă substratul într-un produs colorat sau producătoare de semnal. Modificarea culorii în substratul chimic evidențiază prezența unui anticorp specific în proba serică. Testarea directă ELISA utilizează numai un anticorp primar legat de enzimă. După legarea la antigen, acesta schimbă rapid culoarea, indicând prezența agentului infecțios în sânge. Cu toate acestea, intensitatea semnalelor este mai slabă în ELISA direct, deoarece epitopii sunt limitați la legarea antigenelor. Prin urmare, ELISA direct este mai puțin sensibil în comparație cu ELISA indirectă.

Figura 01: Testul ELISA direct

Ce este ELISA indirect?

ELISA poate fi efectuată utilizând două tipuri de anticorpi; anticorp primar și anticorp secundar. Instrumentul indirect ELISA utilizează ambele tipuri de anticorpi pentru a amplifica semnalele pentru o mai bună detectare. Tehnica ELISA indirectă se efectuează după cum urmează.

Plăcile sunt incubate cu antigeni și spălate pentru a bloca legarea nespecifică.

Apoi anticorpii primari se adaugă și se spală.

1. Anticorp secundar legat de enzimă se adaugă și se spală.
2. Se adaugă un substrat și se lasă să reacționeze cu enzimele.
3. Se detectează semnale și se identifică prezența sau absența antigenului specific din probă.
4. În testul ELISA indirect, mai mulți anticorpi secundari se pot lega de un singur anticorp primar. Anticorpii secundari sunt legați de enzimele ușor analizate. Prin urmare, o legare poate face un semnal puternic datorită mai multor interacțiuni. Prin urmare, metoda ELISA indirectă este mai sensibilă decât metoda ELISA directă. Cu toate acestea, metoda ELISA indirectă poate produce semnale nespecifice datorită reacțiilor încrucișate ale anticorpilor secundari.
5. Figura 02: Testul ELISA indirect

Care este diferența dintre ELISA direct și indirect?

- diff Articol Mijloc înainte de masă ->

Test ELISA direct vs. indirect

ELISA direct este mai puțin sensibil în comparație cu metoda ELISA indirectă.

Testul ELISA indirect este mai sensibil.
Timpul asumat	Testul ELISA direct este un proces rapid.
Testul ELISA indirect necesită mult timp.
Utilizarea anticorpilor	Numai un tip de anticorpi (anticorpi primari) este utilizat în ELISA direct.
Anticorpii primari și secundari sunt utilizați pentru testul ELISA indirect.
Legătura cu enzime	Anticorpii primari sunt legați de enzime.
Anticorpii secundari sunt legați de enzime.
Reactivitatea încrucișată a celor două anticorpi	ELISA direct elimină reactivitatea încrucișată a anticorpilor secundari.
Testul ELISA indirect este afectat de reactivitatea încrucișată a anticorpilor secundari.
Semnale	Semnalele sunt slabe în comparație cu ELISA indirectă.
Semnalele sunt amplificate în metoda ELISA indirectă. Prin urmare, este ușor de detectat.
Rezumat - ELISA direct vs. indirect	ELISA este o tehnică biochimică folosită în principal în imunologie pentru a detecta prezența unui anticorp sau a unui antigen într-o probă de sânge a unui pacient. Se poate realiza prin două procese cunoscute sub denumirea de ELISA direct sau indirect. Testul ELISA direct utilizează numai anticorpi primari pentru detectarea antigenului, în timp ce testul ELISA indirect utilizează atât anticorpi primari, cât și secundari. În ELISA direct, anticorpii primari sunt etichetați, în timp ce în ELISA indirect sunt anticorpi secundari etichetați. Aceasta este diferența dintre ELISA direct și indirect.

Referințe

1. "Analiza imunosorbantă legată de enzime (ELISA). "Buletinul Organizației Mondiale a Sănătății. Biblioteca Națională de Medicină din S.U.A., 1976. Web. 29 martie 2017

2. Loon, A. M van, J. T Van Der Logt, F. W. Heessen și J. Van Der Veen. "Analiza imunosorbantă legată de enzimă care folosește un antigen marcat pentru detectarea anticorpilor imunoglobulină M și A în toxoplasmoză: comparație cu imunofluorescența indirectă și testul imunosorbant dublu-sandwich legat de enzimă. "Jurnalul de Microbiologie Clinică. Biblioteca Națională de Medicină din S.U.A., iunie 1983. Web. 29 Mar. 2017

Imagine Amabilitate:

1. "Diagrama ELISA" de Cavitri - Lucrări proprii (CC BY 3.0) prin Wikimedia

2. "Indirect ELISA" De Cawang - Activitate proprie (CC0) prin Wikimedia Wikimedia